Culture cellulaire et cellules immortalisées (embryon de caille) 33174

Exemple de page de Culture cellulaire et cellules immortalisées (embryon de caille)

Bizzozero Raphaële

Eich Christie

Licence 3 Bio-Eco

Compte-rendu des Travaux Pratiques de Biologie Cellulaire.

Photo de fibroblastes.

(Microscope et grossissement inconnus)

(source: http://fr.wikipedia.org/wiki/Fichier:Fibroblast.jpg)

Décembre 2009

TP1: Mise en culture de cellules issues d'embryons de caille de 5 jours

Introduction

La culture cellulaire est une technique de laboratoire permettant de faire vivre in vitro des cellules, de diverses natures et origines, d'en modifier leurs propriétés ou d'augmenter leur nombre, afin d'en disposer en grande quantité pour ce qu'on veut en faire. C'est un outil indispensable à la biologie cellulaire eucaryote, les domaines d'application sont vastes, entre autre la recherche pour le cancer, les études chromosomiques, le renouvellement tissulaire.

C'est en 1885 que le professeur Ross Harrison annonce la première méthode de culture cellulaire avec des neuroblastes de grenouilles cultivé en dehors du corps. Puis à partir de 1902 c'est Alexis Carrel qui marque l'essor de ces cultures in vitro en améliorant les techniques d'obtention des tissus, l'élaboration des règles d'asepsie et les besoins nutritionnels des cellules. C'est en 1952 que Moscona marque un tournant lors de l'introduction de la trypsinisation des tissus qui permet d'obtenir des cellules isolées ou des amas de cellules capablent de se diviser in vitro.

Les conditions et les propriétés du milieu tel que la température, l’humidité et les équilibres acido-basiques sont primordiales, les cellules doivent survivre et proliférer dans des conditions artificielles de laboratoire. Selon les cellules à cultiver, la composition du milieu change et les paramètres cités précédemment aussi . Comme les cellules ont des besoins qui ne sont pas toujours compris, on utilise souvent du sérum animal (liquide sanguin débarrassé de ses protéines de coagulation), tel que le sérum de veau, qui contient des oligoéléments et des hormones essentielles pour leur développement. La mise en culture des cellules doit se faire en conditions stériles, en effet le temps de génération des bactéries ( 20-30 min) est bien plus rapide que des cellules animales (24h-48h), il y a donc un risque de contamination, qui peut agir sur la croissance, altérant les caractéristiques et les fonctions cellulaires, les résultats pouvant être fossés.